基于网络药理学方法探索麻杏石甘汤治疗新型冠状病毒肺炎机制研究

目的:采用网络药理学方法探索麻杏石甘汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的机制。方法:检索中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中国天然产物化学成分库,BATMAN-TCM等数据库检索麻杏石甘汤相关中药化学成分及潜在靶点,通过CTD、TTD、DrugBank数据库挖掘新型冠状病毒肺炎相关的作用靶点,两者取交集筛选,再进行富集分析。结果:筛选出麻杏石甘汤生物活性成分279个,预测出麻杏石甘汤相关的靶点1417个,新型冠状病毒肺炎相关的作用靶点49个,通过韦恩图取交集得到麻杏石甘汤中参与新型冠状病毒肺炎的靶点24个,靶点质相互作用网络构建筛选出关键靶点24个。DAVID富集分析显示,麻杏石甘汤治疗新型冠状病毒肺炎的关键靶点主要参与美洲锥虫病通路、TNF信号通路、麻疹风疹通路、疟疾通路、乙型肝炎通路、炎症性肠病通路、PI3K-Akt信号通路、单纯疱疹病毒感染、甲型流感通路、人类嗜T淋巴细胞病毒I型(HTLV-I)感染通路、哮喘通路、肺结核通路、toll样受体信号通路、Jak-STAT信号通路、cGMP-PKG信号通路等重要通路。结论:麻杏石甘汤治疗新型冠状病毒肺炎主要参与抗病毒、抗炎、调节免疫、抗疟、抗肺损伤等多靶点、多通路发挥作用。     

柔筋胶囊HPLC指纹图谱及指标性成分含量测定

目的:建立柔筋胶囊的HPLC指纹图谱,并测定其主要成分的含量,为柔筋胶囊的质量控制提供可靠方法。方法:采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水溶液进行梯度洗脱,检测波长为220 nm,柱温为25℃,流速为1.0 mL/min。应用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)对10批柔筋胶囊进行分析评价,建立柔筋胶囊的HPLC指纹图谱,并测定主要成分含量。结果:确定了15个共有峰,通过对照品比对指认了其中3个色谱峰,分别为没食子酸、大黄素和大黄酚,10批样品的相似度均大于0.99。定量测定的3种成分在各自线性范围内线性关系良好(r0.999,6),平均加样回收率99.54%～101.94%,RSD为0.92%～1.86%。结论:所建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法为柔筋胶囊的质量评价提供了科学依据。     

肿瘤坏死因子α增强全反式维甲酸诱导早幼粒白血病细胞凋亡

目的:分析肿瘤坏死因子α增强全反式维甲酸诱导早幼粒白血病细胞凋亡的作用。方法:选择NB4人急性早幼粒白血病细胞，利用全反式维甲酸单独作用，并选择肿瘤坏死因子α联合全反式维甲酸作用，测定细胞增殖以及细胞凋亡情况。结果:随着早幼粒白血病细胞分化的逐渐进行，单一组、联合组的细胞增殖速度均慢慢下降；随着早幼粒白血病细胞分化的逐渐加深，单一组、联合组细胞凋亡率慢慢升高；分化2天，联合组细胞CD11b阳性率明显高于单一组，P<0.05。结论:全反式维甲酸具有诱导早幼粒白血病细胞分化、凋亡的作用，而肿瘤坏死因子α会增强全反式维甲酸的作用效果。     

大鼠骨癌痛模型中脊髓背角神经元与星型胶质细胞相互联系的研究

目的:研究大鼠骨癌痛模型中脊髓背角神经元与星型胶质细胞相互联系。方法:利用Walker256乳腺癌细胞建立大鼠骨癌痛模型后，分别鞘内注射药物阻断神经元的活化（c-Fos反义寡核苷酸探针，c-Fos ASO）和星形胶质细胞的活化（L-α-aminoadipate，L-α-AA），然后分别检测大鼠痛行为学改变；利用免疫荧光染色法和Western blot实验检测大鼠脊髓背角神经元活化标记物c-Fos和星形胶质细胞标记物GFAP的表达变化。结果:骨癌痛大鼠出现了显著的痛行为学改变并激活了脊髓背角神经元和星形胶质细胞，表现为早期c-Fos和晚期GFAP的表达增加。鞘内注射c-Fos ASO或L-α-AA均有明显镇痛效果。免疫荧光染色提示c-Fos ASO不仅能显著抑制骨癌痛大鼠神经元的活化，而且对星形胶质细胞的活化也有抑制作用。与此同时，Western blot显示L-α-AA不但抑制了星形胶质细胞的活化，也缩短了神经元的活化时间。结论:神经元和星形胶质细胞相互联系伴随着骨癌痛的发生发展。因此，研究新的镇痛策略，应综合考虑两者的协调关系。     

颞下颌关节强直动物模型中最大张口度与强直严重程度关系研究

目的　研究主、被动最大张口度（AMMO、PMMO）与颞下颌关节强直严重程度的关系。方法　选取28只健康雄性绵羊随机分为实验组和对照组，每组各14只。实验组绵羊双侧颞下颌关节模拟髁突矢状骨折，其中左侧翼外肌被切断以阻断其功能；对照组绵羊未进行手术。于术前及术后12、24周对所有绵羊体重、AMMO、PMMO、颞下颌关节形态学特点进行测量评估。结果　实验组只有右侧保留翼外肌功能的颞下颌关节发生了骨强直。术后12、24周，实验组绵羊AMMO、PMMO、极限距离均显著低于对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。实验组绵羊AMMO和PMMO与骨融合区宽度、长度、面积及钙化程度均呈负相关（均P < 0.05），其中骨融合区面积为主要影响因素（术后12、24周相关系数r分别为-0.94、-0.95）。结论　颞下颌关节强直动物模型中阻断翼外肌功能可阻止骨强直的发生；对于早期髁突矢状骨折，可通过牙合垫或牙合板进行张口训练，进而阻断翼外肌功能。当颞下颌关节发生骨强直时，骨融合区面积越大，张口受限越明显。